Abstract

Ovaj izvještaj pruža detaljnu tehničku analizu toksikološkog i genotoksikološkog profila kiselih oligosaharida (PAOS) ​​dobijenih od pektina{0}}, specifičnog oblika modificiranog citrusnog pektina. Analiza je zasnovana na sveobuhvatnoj procjeni sigurnosti koju su izvršili Garthoff et al. inRegulatorna toksikologija i farmakologija (2010).¹Ključna područja fokusa uključuju fizičko-hemijsku karakterizaciju materijala i profil čistoće, kritičku interpretaciju divergentnog

in vitroprotivin vivopodaci o genotoksičnosti i mehaničko razjašnjavanje hiperplazije urotela specifične za vrstu-uočene na modelima glodara. Podaci zajedno uspostavljaju robustan sigurnosni profil za ovaj novi prebiotski sastojak.

Karakterizacija materijala i profil čistoće

PAOS preparat procijenjen u ključnim sigurnosnim studijama proizveden je od pektina -vrste hrane putem specifične enzimske metode. U procesu se koristi poli(metoksil- -galakturonid) liaza (EC 4.2.2.10) i poli(1,4-alfa-D-galakturonid) glikanhidrolaza (EC 3.2.1.15), obje izvedene iz nepatogenog {10}nepatogenog sojaAspergillus niger.¹Dobiveni proizvod je mješavina linearnih oligomera galakturonske kiseline, sa ključnim specifikacijama identiteta, uključujući sadržaj galakturonske kiseline od 62 g/100 g, molekulsku težinu pretežno ispod 3800 Da (94 g/100 g) i stepen metilacije od 50.¹

Za bilo koji materijal namijenjen za primjenu u ishrani ili istraživanju, profil čistoće je od najveće važnosti. Serija PAOS-a korištena u studijama temeljito je analizirana na kontaminante i ostatke. Nivoimodificirani citrusni pektin teški metalii drugih zagađivača je utvrđeno da su izuzetno niske, u skladu sa principima relevantnog zakonodavstva i dobre poljoprivredne prakse.¹Sažetak ovih nalaza je predstavljen u nastavku.

Podaci izvučeni iz Garthoff et al., 2010¹

Nizak nivoi mikrograma-po-kilogramu za ključne teške metale kao što su kadmijum, olovo i živa naglašavaju čistu prirodu sirovine i proizvodnog procesa.

Kritička analiza podataka o genotoksičnosti

Procjena genotoksičnosti PAOS-a dala je rezultate koji naglašavaju važnost sagledavanja kompletne toksikološke slike, posebno odnosa izmeđuin vitroiin vivopodaci. PAOS definitivno nije bio mutagen u testu bakterijske reverzne mutacije (Amesov test) na pet sojeva, sa i bez metaboličke aktivacije.¹

Međutim, thein vitrotestovi ćelija sisara dali su složenije rezultate. Test limfoma miša je smatran "dvosmislenim" zbog pozitivnih odgovora na visoko citotoksične koncentracije koje nisu bile reproducibilne i nisu imali jasan odnos doze{1}}odgovora.¹Slično, u testu hromozomske aberacije koristeći CHO ćelije, PAOS se u početku smatrao klastogenim u uslovima kontinuiranog tretmana. Naknadna{1}}istraga je otkrila da je ovaj efekat u velikoj mjeri ovisan o citotoksičnosti i korištenom rastvaraču (DMSO). Kada je PAOS suspendovan u mediju kulture-fiziološki relevantnijem nosaču-značajan porast aberantnih ćelija je uočen samo pri najvišoj preporučenoj dozi (

5000 ug/ml) i bio je povezan sa visokom citotoksičnošću (MI od 34%), što je navelo autore da zaključe da nije biološki relevantno.¹Ovi nalazi ukazuju na pozitivno

in vitrorezultati su vjerovatno bili artefakti uzrokovani citotoksičnošću, poznatim zbunjujućim faktorom u takvim testovima.

Definitivni in vivo sigurnosni profil

Fiziološki najrelevantniji podaci za procjenu genotoksičnog rizika dolaze izin vivostudije. Mikronukleusni test je integrisan u 13-sedmičnu studiju subhronične oralne toksičnosti na pacovima, dizajn koji osigurava produženo izlaganje ispitivanoj supstanci i njenim metabolitima. Studija, koja je uključivala i anin uterofaza izloženosti, pokazala je da PAOS ne utiče na zdravlje roditelja, plodnost, reprodukciju ili karakteristike šteneta.¹Ono što je najvažnije, analiza ćelija femoralne koštane srži pacova u grupi sa visokim-dozama (10% PAOS u ishrani, unos veći od

7 g/kg t.¹Nadalje, omjer polihromatskih i normokromatskih eritrocita bio je nepromijenjen, što ukazuje da nema citotoksičnosti za koštanu srž.¹Ovo negativno

in vivorezultat daje definitivan dokaz da PAOS ne posjeduje genotoksičnu aktivnost u fiziološkim uslovima.

Mehanističko objašnjenje specifičnog artefakta-vrste

Sub{0}}kronična studija otkrila je difuznu urotelnu hiperplaziju kod pacova hranjenih 10% PAOS-a. Umjesto da bude pokazatelj direktne toksičnosti oligosaharida, pretpostavlja se da je ovo sekundarni učinak. Dodatna mehanička studija osmišljena je kako bi se testirala hipoteza da je hiperplazija uzrokovana istovremenim povećanjem koncentracije natrijuma u urinu i pH, stanje za koje se zna da izaziva ovaj specifični učinak kod štakora.¹Studija je uključivala grupu hranjenu 10% PAOS plus agens za zakiseljavanje

NH4​Cl. Rezultati su bili nedvosmisleni: nizak pH urina u grupi NH4​Clpotpuno spriječili razvoj urotelne hiperplazije.¹Ovo je potvrdilo mehanizam i pokazalo da efekat nije svojstven PAOS-u, već je vrsta{0}}specifičan artefakt fiziologije urina, koji se ne smatra relevantnim za ljude.¹

Strogost prikazana u ovim studijama odražava naučnu posvećenost vodećih proizvođača kao što je Zhejiang Gold Kropn Biotechnology Co., Ltd. Kao nacionalna kompanija visoke tehnologije-koja sarađuje sa vrhunskim-univerzitetima, kompanija daje prioritet ne samo proizvodnji već i dubokom naučnom razumijevanju svojih proizvoda. Njihova upotreba napredne enzimske hidrolize u 100.000-GMP-certificiranom pogonu osigurava proizvodnju visoko čistoćemodifikovani citrusni pektinpogodan za zahtjevne primjene istraživanja i razvoja. Da zatražite tehničke specifikacije, certifikat o analizi ili da razgovarate o istraživačkoj saradnji, kontaktirajte wilson@zjgykp.com.

Zaključak: Dobro-karakteriziran sastojak za istraživanje i razvoj

Modificirani citrusni pektin (PAOS) ​​je materijal s temeljno istraženim i povoljnim sigurnosnim profilom. Sveobuhvatni podaci pokazuju da nije-mutagenoin vivoi potencijalne zabrinutosti odin vitrotestovi su racionalizovani kao artefakti citotoksičnosti. Opažanje urotelne hiperplazije kod pacova mehanički je objašnjeno kao vrsta{1}}specifičan odgovor na promijenjenu hemiju urina i nije relevantno za ljude. Visoka čistoća materijala i izuzetno nizak nivo kontaminanata, uključujući teške metale, čine ga dobro-okarakterisanim i pouzdanim sastojkom za dalja istraživanja i razvoj u oblasti ishrane i farmakologije.

Citirani radovi

sigurnost pektina 1.pdf